将纯化的确诊HIV蛋白抗原裂解，然后通过SDS-PAGE按分子量大小将其分离，再转印至硝酸纤维素薄膜上，并保存于4℃干燥试管内，测定时将割成膜条的硝酸纤维素薄膜与待检样品反应，使其充分接触。若样品中含有HIV抗体，将会与膜条上的抗原区带结合，再加上酶标抗人IgG抗体，经过与底物反应显色，即可形成肉眼可见的不同区带。
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